La sédimentation de la centrifugeuse de la banque de sang est directement liée à la force centrifuge, et la force centrifuge est liée à la méthode centrifuge et à la vitesse de rotation!
L'application séquentielle du fractionnement par débit du champ de sédimentation de la centrifugeuse de la banque de sang peut élargir considérablement la plage de séparation du poids moléculaire dans une expérience.Il y a deux façons d'obtenir la séquentialisation: en modifiant progressivement la vitesse de la centrifugeuse de la banque sanguine ou en modifiant la densité du support.Commencez avec un champ fort pour séparer l'échantillon avec le plus petit poids moléculaire, puis réduire progressivement la vitesse de rotation ou arrêter la rotation complètement pour promouvoir l'échantillon de gros poids moléculaire à la lixiviation hors de la colonne.les différentes tailles de particules de polystyrène sont séparées avec succèsLe latex, qui équivaut à une différence de poids moléculaire de 1000 fois.
La méthode de centrifugation par zone de vitesse consiste à charger un milieu à gradient de densité (comme le saccharose, le glycérol, le KBr, le CsCl, etc.) dans le tube de centrifugation de la banque de sang avant la centrifugation.L'échantillon à séparer est placé sur le dessus de la solution de gradient.Le gradient est centrifugé ensemble après centrifugation, le flux de sang est centrifugé et le flux de sang est centrifugé.la densité du milieu sur l'axe de rotation proche (X1) est la plus faible, et la densité du milieu (X2) le plus éloigné de l'axe de rotation est la plus élevée, mais la densité maximale du milieu doit être inférieure à la densité minimale des particules de l'échantillon, c'est-à-direρP>ρmCette méthode est basée sur la différence de vitesse de sédimentation des particules séparées dans le liquide de gradient,et les particules ayant des vitesses de sédimentation différentes sont divisées en une série de zones dans différentes couches de gradient de densité pour obtenir la séparation les unes des autresLe liquide de gradient agit comme support et stabilisateur pendant la centrifugation et après la centrifugation pour éviter le remisage des particules en couches dues à des vibrations mécaniques.
Comme ρP>ρm sait que S>0, le temps de centrifugation de la méthode de centrifugation est strictement contrôlé et chaque particule dispose d'un temps suffisant pour former une zone dans le gradient moyen,et de contrôler avant que les particules atteignent la précipitationSi le temps de centrifugation est trop long, tous les échantillons peuvent atteindre le fond du tube de centrifugation de la banque de sang; le temps de centrifugation est insuffisant et l'échantillon n'a pas été séparé.Puisque cette méthode est un règlement incomplet, le dépôt est fortement affecté par la taille de la substance elle-même, et est généralement appliqué lorsque la taille du matériau est différente et que la densité est la même.Les gradients couramment utilisés sont Ficoll, Percoll et saccharose.
Conversion de la vitesse de la centrifugeuse de la banque de sang et de la force centrifugeuse: (formule de calcul du facteur de séparation de la centrifugeuse de la banque de sang)
1. La signification du facteur de séparation:
Le rapport des coefficients de partition des deux solutes dans les mêmes conditions dans le même système d'extraction.plus la séparation des deux solutes est bonne, le facteur de séparation est égal à 1, les deux solutes sont inséparables.
2Les principaux facteurs qui influent sur le facteur de séparation:
La force centrifuge n'existe pas en tant que force réelle. Dans le système non inertiel, c'est une force qui est pratique à calculer.La force centripète attire un objet vers un point central.Descartes interprète la force centrifuge comme une tendance d'un objet à maintenir sa " quantité limitée "." La différence est que la force centripète est sous le cadre de référence inertielLa force centrifuge est la force dans le système non inertiel, et la force centrifuge est la force dans le système non inertiel.donc le concept de la force centrifuge n'est généralement pas utiliséComme il ne s'agit pas d'un concept, nous ne pouvons pas comparer leur direction et leur taille.
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